[FCIEN] Clonado de las fosfatasas en tirosina de Listeria Monocitogenes

32114scr_654aa682ea813a1Listeria monocytogenes es una bacteria patógena responsable de la Listeriosis. L. monocytogenes puede sobrevivir a muchas de las condiciones usadas en la preservación de los alimentos y por lo tanto contaminarlos y convertirse en un riesgo potencial para la salud humana. Es poco frecuente en humanos, pero extremadamente grave, causando una mortalidad de un 70 % en los grupos sensibles (niños, ancianos, embarazadas e inmunodeprimidos). El primer objetivo de este proyecto fue clonar las tres fosfatasas en tirosina de L. monocytogenes codificadas por los genes lmo0938, lmo1935, lmo 2540 ya que estas fosfatasas se piensan son factores de virulencia importantes en la definición de la enfermedad. El segundo objetivo fue optimizar las condiciones de producción de dichas fosfatasas en una bacteria no patógena, Escherichia coli, lo que permite obtenerla en grandes cantidades, facilita su purificación y posterior caracterización bioquímica. Con el fin de cumplir con los objetivos planteados utilizamos técnicas de biología molecular para amplificar selectivamente los genes de interés y lograr la expresión del mismo en una bacteria no patógena. Hasta el momento hemos logrado obtener una de ellas, la fosfatasa codificada por el gen lmo0938, habiendo logrado producirla en E.coli y demostrado que presenta actividad fosfatasa. Esta fosfatasa es similar al factor de virulencia de M.tuberculosis, por lo cual, la continuación del proyecto podría contribuir a entender si diferentes patógenos intracelulares comparten o no mecanismo de acción, así como si sin blancos interesantes para el diseño de drogas.

Integrantes del equipo:
Bibiana Nieves
Matías Maidana
Viviana Irving

Docente orientadora:
Andrea Villarino

2016-12-06T14:39:47+00:00