[FVET] OPTIMIZACIÓN DE UNA TÉCNICA DE EXTRACCIÓN DE ADN A PARTIR DE FOLÍCULO PILOSO DE DIFERENTES ESPECIES.

32114scr_654aa682ea813a1Integrantes del equipo:
Maria Pía Grignola Martin
Claudia Corbi

Docente Orientador:Dra. Silvia Llambí Dellacasa

La extracción de ADN se puede realizar de distintas muestras biológicas y con distintas técnicas, siendo un punto crítico para estudios basados en real time PCR. El primer objetivo consistió en optimizar una técnica de extracción de ADN de folículo piloso de bovinos y suinos (método no invasivo). La extracción se realizará con resina Chelex, método simple, reproducible, económico variando la cantidad de folículos y la realización de lavados previos. Se comenzó a estandarizar el genotipeado de SNPs mediante la técnica HRM (High Resolution Melting) utilizando como modelo un polimorfismo en el gen leptina.

Este método de análisis discrimina genotipos en función del cambio de forma de la curva de disociación y de variación en la temperatura de disociación del ADN. En cuanto a resultados se obtuvo una buena concentración y pureza de ADN. No se observó diferencias en cuanto a cantidad de folículos ni a las modificaciones realizadas (lavado previo). Se obtuvo la temperatura óptima y específica de amplificación de los cebadores y la curva de fluorescencia en función al producto amplificado por ciclo. En conclusión la extracción de ADN de folículo piloso con Chelex es potencialmente adecuado para en un futuro discriminar genotipos por HRM.

2016-12-06T14:37:48+00:00